生物学的サンプル中のNMNを定量するための科学的方法

生物学的サンプル中のNMNを定量するための科学的方法



1. はじめに

適切なニコチンアミドモノヌクレオチド(NMN)に変換します。以上调は、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド(NAD+)已被揭示是一种有前景的抗衰老干预措施。然而,仍然是一个严峻的挑战,即准确定量NAD+中间体, NMN 尤其是。本研究旨在引入一种新方法,双同位素介导的LC-MS/MS方法(dimeLC-MS/MS),用于精确定量NMN 在生物样本中.

2. 影响NMN准确检测的因素

NMN由于其易受酶降解、样本处理中的转化、在不同色谱柱和提取条件下的复杂行为以及基质效应的影响,难以被准确检测。


具体来说,NMN具有高极性和低挥发性的特性,易溶于水但难溶于有机溶剂。这些特性极大地限制了多种常规定量分析方法的应用。

B生物样本例えば、血液携带显著的CD38和CD73(外切-5'-核苷酸酶)活性,两者均可将NMN作为底物。

NMN在色谱柱中的行为非常复杂,可能是因为其电荷的双重性质,因此提取和色谱柱条件的细微差异会显著影响NMN的可靠和准确检测。

3. dimeLC-MS/MS的应对策略dimeLC-MS/MS以减少影响因素的影响

为避免上述因素的干扰,采用了一种原型原型色谱柱NMN-2。该色谱柱含有C18基高纯度硅胶颗粒,其比碳颗粒更能结合亲水性化合物,提高了分离能力。

P高氯酸(PCA)被采用,因为它可以高效地从血浆等生物样本中提取NAD+ 和NMN,且损失最小 .

为调整基质效应,合計13の在PCA提取前,向 同位素化合物生物样本中加入固定量(1 μM)的每种.

4. dimeLC-MS/MS的优势dimeLC-MS/MS的优势

D在LC-MS/MS驱动的方法中,双同位素NMN标准品, NMN(M + 14)和NMN(M + 5),可以精确追踪NMN在样本处理过程中的去向,这显著提高了生物样本中NMN测量的准确性和可靠性。此外,dimeLC-MS/MS可以评估不同类型生物样本中NMN的提取效率和绝对浓度。

5. 結論

新的LC-MS/MS-驱动方法,采用双同位素NMN标准品 能够准确且可靠地测量生物样本中的NMN。ly生物学的サンプル中のNMNを測定する。 它可用于未来关于NMN摄入的研究。

6. 参考文献

Unno, Junya等人。“通过双同位素介导的液相色谱-串联质谱法(dimeLC-MS/MS)对生物样本中烟酰胺单核苷酸的绝对定量。”npj aging 第10卷,第1期,第2页。2024年1月2日,doi:10.1038/s41514-023-00133-1

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