生物学的サンプル中のNMNを定量する科学的手法
1. はじめに
補足ニコチンアミド・モノヌクレオチド(NMN)規制をアップレギュレーションするためにレベルのニコチンアミドアデニンジヌクレオチド(NAD+)有望なアンチエイジング介入策であることが明らかになりました。しかし、それでも正確に判断するのは大きな挑戦ですNAD+中間体を定量化し、 NMN 特に。本研究は、二重同位体媒介LC-MS/MS(DIMELC-MS/MS)という新しい手法を導入し、NMN 生物学的サンプルにおいて.2. NMNの正確な検出に影響を与える要因
NMNは酵素性に対して脆弱であるため、正確に検出が難しいです劣化、試料処理における変換、異なるカラムおよび抽出条件下での複雑な挙動、そしてマトリックス効果についても含まれます。
具体的には、NMNは高極性と低揮発性の特性を持ち、水に溶けやすいが有機溶媒に溶けるのは難しいです。これらの特性は、多くの従来の定量的分析手法の適用を大きく制限しています。
B生物学的サンプル例えば血液はCD38およびCD73(ecto-5)の有意な活性を運んでいます’-ヌクレオチダーゼ)を基質としてNMNを利用することができました。
カラム内のNMNの挙動は非常に複雑で、おそらく電荷の二部構成であるためで、抽出やカラム条件の微妙な違いがNMNの信頼性と精度に大きく影響します。
3. 対処戦略ダイムLC-MS/MSインパクトファクターの影響を軽減するために
上記の要因の干渉を避けるために、pロトタイプ柱NMN-2は適用されます。このコラム含まれsC18系高純度シリカ粒子これらの化合物は炭素粒子よりも親水性化合物に結合しやすく、分離能力を向上させます。Pエルクロリン酸(PCA)は用いられるので効率的にNAD+を抽出する そして、最小限の血漿などの生物サンプルからNMNを得られる 損失.
行列効果を調整するために、aそれぞれの固定量(1μM)を 同位体化合物isは生物学的PCA抽出前のサンプル.
4. 利点s10セントのLC-MS/MS
D劣化同位体NMN標準、 NMN(M + 14)およびNMN(M + 5)は、LC-MS/MS駆動の手法において、サンプル処理中のNMNの運命を正確に追跡できます、生物サンプルにおけるNMN測定の精度と信頼性を大幅に向上させます.さらに、ダイムLC-MS/MSはさまざまな生物サンプルにおける抽出効率やNMNの絶対濃度を評価できます。
5. 結論
Thは新しいLC-MS/MS-二重同位体NMN標準を用いた駆動型手法 できるアキュラテリーそしてリリアブリー生物サンプルでNMNを測定します。 今後のNMN摂取に関する研究にも活用可能です。6. 参考文献
卯野潤也ら「二重同位体媒介液クロマトグラフィー-タンデム質量分析(dimeLC-MS/MS)による生体試料中のニコチンアミドモノヌクレオチドの絶対定量」 npj aging、第10巻、第1巻、2。2024年1月2日、doi:10.1038/s41514-023-00133-1なぜ選んだのかボンタック?
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